Методы лабораторной диагностики вирусного гепатита В

2. Биуретовый реактив.

Содержимое одного флакона с концентрированным раствором биуретового реактива перенести в мерную колбу емкостью 500 мл и довести до метки дистиллированной водой. Потом перенести в полиэтиленовую емкость, которая герметично закрывается. Раствор стабильный.

Ход определения

Смешивают, оставляют на 30 мин при комнатной температуре (от + 18°С до +25°С). Измеряют оптическую плотность калибровочной и исследуемой проб против холостой на АБхФк-02 - «НПП-ТМ», длина волны 540 нм. Окрашивание стабильно в течение 60 минут.

Расчет

концентрации общего белка проводят по формуле:

С= Еиссл /Екалх100. где

С - концентрация общего белка в исследуемой пробе, г/л;

- концентрация общего белка в калибровочном растворе, г/л;

Еиссл - оптическая плотность исследуемой пробы, ед. опт. плотности;

Екал - оптическая плотность калибровочной пробы, ед. опт. плотности.

Нормальные величины

65-85 г./л.

Примечания

1. Биуретовая реакция чувствительна к температуре. Повышение температуры увеличивает скорость развития окраски. Поэтому определение необходимо проводить при одной и той же температуре. Обычно это комнатная температура.

2. Время экспозиции проб в ходе исследования также сказывается на интенсивности окраски реакционной смеси. Поэтому для получения сопоставимых результатов колориметрирование всегда проводится через одинаковые интервалы времени, которые выбирают в промежутке между 30 - 60 мин. экспозиции.

. Содержание белка в стандартном растворе должно быть не меньше 70 г./л.

. При содержании белка в сыворотке крови больше 100 г./л сыворотку разводят физиологическим раствором, а результаты умножают на коэффициент разведения.

. Все реактивы готовят на прокипяченной дистиллированной воде.

Заключение

Острый вирусный гепатит В передается преимущественно парентеральным путем (с продуктами крови, при использовании инфицированных шприцев и т.д.), при половых контактах, а также вертикально (от матери ребенку). Инкубационный период может колебаться в зависимости от дозы возбудителя. От момента заражения до развертывания клинических проявлений может пройти 160 дней. НВsAg обнаруживается в сроки от 6 до 43 дней с момента инфицирования. Часто наблюдается безжелтушное течение заболевания. Выздоровление отмечается более чем в 95% случаев. Однако острый вирусный гепатит В следует считать потенциально опасным, поскольку возможны переход в хроническую форму, развитие вирусоносительства и возникновение фульминантного гепатита.