Методы лабораторной диагностики вирусного гепатита В

КФК-3 №9001438

кювета 5 мм, λ=530 нм

Стандарт: Билирубин - стандарт ф. Lachema 391,51 мкмоль/л

Годен до 31.01.2012 г.

Масштаб 1 мкмоль/л = 1 мм

ΣЕ=0,768; Е0,360=147 мм;

ΣС=313,2; 1Е = 147х1/0,360=408,3

F=313,2/0,768=407,12; 1т. 0,049 = 0,049х408= 19,9 мм;

F=3,6; 2т. 0,122 = 0,122х408 = 49,7 мм;

т. 0,238 = 0,238х408 = 97,1 мм;

т. 0,359 = 0,359х408 = 146,7 мм.

Нормальные величины.

Содержание общего билирубина - 8,55 - 20,52 мкмоль/л. Из него 75% приходится на долю непрямого.

Примечания

1. Сыворотка не должна быть гемолизирована.

2. Перед определением билирубина обследуемый человек не должен принимать лекарства и пищу, которые вызывают искусственное окрашивание сыворотки (морковь, апельсин), а также витамин «С».

Метод определения активности аспартатаминотрансферазы (К.Ф. 2.6.1.1.) в сыворотке крови динитрофенилгидразиновым методом (по Райтману, Френкелю, 1957)

Принцип метода

Аспартатаминотрансфераза (

L

-аспартат: 2-оксоглутарат аминотрансфераза, К.Ф. 2.6.1.1.)

катализирует реакцию между L-аспартатом и 2-оксоглутаратом, в результате которой они превращаются в L-глутамат и оксалацетат. Определение основано на измерении оптической плотности гидразонов и 2-оксоглутаровой и пировиноградной кислоты в щелочной среде. Гидразон пировиноградной кислоты, возникающей при самопроизвольном декарбоксилировании оксалацетата, обладает более высокой оптической плотностью.

Реактивы

1. Эталонный раствор натрий пировинограднокислый 2 ммоль/л

2. 2,4 - динитрофинилгидразин раствор 1 ммоль/л в НСl 1 моль/л

. Натрий гидроокись

. Субстрат АсАТ:

фосфатный буфер 0,1 моль/л

L-аспартат0,1 моль/л

2-оксаглуторат 2 ммоль/л

. 0,9% р-р NaCl

Приготовление рабочего раствора

Раствор гидроокиси натрия

В мерной колбе вместимостью 1000 мл растворяют в дистиллированной воде содержимое флакона с Реактивом 3. Раствор устойчив.