Методы лабораторной диагностики вирусного гепатита В

ΣЕ=0,773; Е0,300=110 мм;

ΣС=2,78; 1Е = 366,7

F=2,78/0,773=3,596; 1т. 0,08 Е = 0,008х366,7 = 29,3 мм;

F=3,6; 2т. 0,16 Е = 0,16х366,7 = 58,6 мм;

т. 0,23 Е = 0,23х366,7 = 84,3 мм;

т. 0,303 Е = 0,303х366,7 = 1,11 мм.

Масштаб 1 мккат = 100 мм

Расчет

По оптической плотности пробы в калибровочном графике находят концентрацию фермента.

Предупреждение

Пробы сыворотки крови можно хранить при температуре (от +2 до +8)°С в течении одной недели.

При каталитической концентрации фермента свыше 0,56 мккат/л анализ проводят с сывороткой, разбавленной физиологическим раствором (результат умножить на разведение).

Повышенное содержание кетоновых тел (в сыворотках диабетиков) вызывает повышение активности ферментов АсАТ и АлАТ. В таких случаях необходимо вычесть из оптической плотности пробы оптическую плотность сывороточного контрольного раствора. Сывороточный контрольный раствор приготавливают точно так же, как и пробу, с той лишь разницей, что сыворотку добавляют в пробирку после реактива 2.

Гемолиз повышает каталитическую концентрацию ферментов АсАТ и АлАТ. Снижение результатов вызывают синтетические моющие средства (сапонаты).

Референтные величины

АлАТ (мккат/л) 0,06-0,14

Предельные величины 0,42

Метод определения общего белка в сыворотке крови по биуретовой реакции

Принцип метода

Белки реагируют в щелочной среде с сернокислой медью с образованием соединений, окрашенных в фиолетовый цвет (биуретовая реакция).

Реактивы

1. Лиофилизированный альбумин для приготовления 5 мл калибровочного раствора (100+2) г/л или 5 мл готового раствора альбумина (100+2) г/л.

2. Биуретовый реактив (концентрированный раствор):

- сульфат меди (15.0+0,75) г/л;

гидроокись натрия (40,0+2) г/л;

калия нитрат тартрат (45,0+2,25) г/л;

йодит калия (25,0+1,25) г/л;

Оборудование

1. Анализатор биохимический фотометрический кинетический АБхФк-02 - «НПП-ТМ».

2. Колба мерная емкостью 500 мл, пробирки емкостью 10 мл (ГОСТ1770-74).

. Пипетки емкостью 1; 0,1; и 5 мл (ГОСТ 29227-91).

Приготовление рабочих растворов

1. Калибровочный раствор альбумина

. Если флакон содержит лиофилизированный альбумин

, то в него вносят, аккуратно вытащив крышку, точно 4,5 мл физиологического раствора. Флакон закрывают крышкой и, не допуская пены, легкими вращательными движениями руки перемешивают его содержимое до полного растворения. Флакон не взбалтывать. Хранить при температуре от +2°С до +4°С. Раствор содержит (100+2) г/л альбумина. Если во флаконе раствор, то он готовый для использования.