Результаты

В нашей работе была получена степень эффективности ингибитора (противовирусного препарата) методами ФОЕ (стандартный вирусологический метод) и флуоресцентной детекции. Обработка результатов ингибирования фокусов и интенсивности флуоресценции системой пробит- анализа позволяет находить необходимый параметр IC50, а также сравнивать различные методики для его нахождения.

На рисунке 19 представлены полученные IC50 для ингибитора фетуин методами ФОЕ и флуоресцентной детекции, которые не отличаются на уровне значимости 5%. Данные о степени эффективности ингибитора приведены ниже в таблице 3.

Также при решении обратной задачи метода флуоресцентной детекции были получены кинетические параметры системы «вирус- клетка», полученные для данного вируса Aichi и клеток линии MDCK методом ИФА. Данные о кинетических константах также приведены ниже в таблице 3.

Таблица 3 Кинетические параметры, полученные различными методами (*[40])

Полученные значения, приведенные в таблице 3 хорошо согласуются между собой: при увеличении температуры возрастают k+ и kin (за счет повышения пластичности мембраны клетки (можно сказать ее плавления), что приводит большей гибкости и в конечном итоге к более быстрому (за счет этого с ростом температуры уменьшается tнасыщ) и более крепкому взаимодействию нескольких рецепторов с одним вирионом).

k - остается практически неизменным.

kin возрастает резко: от отсутствия эндоцитоза при 100С до резкого увеличения на порядок при 370С (в сравнении с 320С).

Однако, существенные различия между параметрами, полученными данными методами можно объяснить тем, что во всех методиках, кроме флуоресцентной детекции (ФОЕ, ИФА, [40]) использовался клеточный монослой, тогда как в методе флуоресцентной детекции для насыщения системы клеточными рецепторами, использовалась клеточная суспензия, что объясняет самую быструю адсорбцию вируса на клетку.

Таблица 4 Сравнительная характеристика методов ФОЕ, ИФА и флуоресцентной детекции на основании полученных результатов