Результаты и обсуждение

Влияние окислительных условий на динамику фагоцитарной реакции нейтрофилов

В экспериментах были использованы полиморфноядерные гранулоциты периферической крови двадцати здоровых доноров.

Для оценки динамики изменения фагоцитарной активности интактных и предварительно инкубированных с Н2О2 нейтрофилов была использована модифицированная нами методика постановки реакции фагоцитоза с использованием культуры St. aureus с последовательным отбором проб через 30, 60, 90, 120 мин с начала инкубации. Результаты использовались для оценки основных функциональных параметров фагоцитарной реакции: фагоцитарного показателя (ФП) и фагоцитарного числа (ФЧ).

Как видно из представленных результатов (рисунок 14), в контроле количество клеток, вступающих в фагоцитоз, достигает максимума 78 % (77;80) после 90 минут инкубации с последующим плавным снижением этого показателя до 72% (71;77) к 120 мин.

Таким образом, 90 минут - это время, необходимое для функциональной активации интактных клеток и перехода их в стадию активного поглощения микроорганизмов.

Рисунок 14 - Изменение фагоцитарной активности интактных и инкубированных в окислительных условиях нейтрофилов (p<0,05)

У нейтрофилов, предварительно инкубированных с 0,005 и 0,01 М Н2О2, наблюдается сдвиг максимума фагоцитарной активности в сторону уменьшения времени, необходимого для клеточной активации до 30 мин и значение ФП в этой точке достоверно возрастает до 81% (80;83), кроме этого происходит общее увеличение показателя ФП на 10-25% по сравнению с контролем в течение всего времени инкубации.

Предварительная инкубация нейтрофилов с 0,05М перекисью водорода (рисунок 14) также приводит к увеличению их способности вступать в фагоцитоз, однако этот показатель несколько ниже аналогичного параметра нейтрофилов, обработанных 0,005 М и 0,01 М Н2О2 с максимумом на 90-й мин инкубации.

Таким образом, для Н2О2-обработанных нейтрофилов в целом наблюдается достоверное увеличение показателя фагоцитарной активности в среднем на 10-25% от значения контроля и уменьшается время, необходимое для первичной активации клеток, вступающих в фагоцитоз. Максимум активирующего эффекта наблюдается для клеток, обработанных 0,005 М и 0,01 М Н2О2 . Полученные нами данные хорошо согласуются с результатами других авторов. [42, 43]

Динамика изменения поглотительной способности нейтрофилов после воздействия перекиси водорода также имеет тенденцию к значительному возрастанию. Следует отметить, что изменение данного показателя для контрольной пробы имеет два пика - максимум поглощения на 60 мин инкубации и минимум поглощения на 90 мин, при сохраняющемся среднем значении поглощения на уровне 5 (4,7;5,3) на 30, 120 мин инкубации.

Для нейтрофилов, предварительно инкубированных с 0,005 М Н2О2, наблюдается аналогичная динамика поглотительной способности (рисунок 15), но значения данного параметра почти на единицу достоверно выше для всех контрольных точек в ходе фагоцитарной реакции (p<0,05).

Нейтрофилы, предварительно инкубированные с 0,01 М Н2О2 и 0,05 М Н2О2 также демонстрируют большую поглотительную способность по сравнению с контролем. В этом случае также наблюдается увеличение значений поглощения микроорганизмов более чем на единицу и также с максимумом на 60 мин инкубации и минимумом на 90 мин.

Рисунок 15 - Изменение поглотительной способности интактных и инкубированных в окислительных условиях нейтрофилов в ходе фагоцитарной реакции (p<0,05)