Экспериментальная часть

Одной из основных задач данной дипломной работы является изучение взаимодействия вируса гриппа именно с живой клеткой. Живая система характеризуется своей изменчивостью во времени, она постоянно находиться в движении. Поэтому при проведении экспериментов очень важно следить за более или менее одинаковыми внешними и внутренними условиями эксперимента. Например, очень важно следить за концентрацией вирусных частиц в суспензии: это влияет не только на определение параметров связывания вируса с клеткой, но и на применимость самой модели (должно соблюдаться условие [R]>>[V], см. Теоретическую часть). Главной изменяющейся единицей в этом процессе является клетка, а точнее ее рецепторы.

При проведении экспериментального изучения кинетики взаимодействия вируса с живой культурой клеток предварительно были охарактеризованы следующие параметры:

1. оптимальный возраст монослоя клеток, при котором рецепторные свойства клеток меняются незначительно за время проведения кинетического эксперимента (~48 часов [41])

2. оптимальная концентрация клеток и, как следствие, концентрации клеточных рецепторов(R=N∙r, N - количество клеток в монослое, r - количество рецепторов на поверхности одной клетки) (~106 клеток в лунке)

. концентрация вирусных частиц в суспензии, используемой для эксперимента, (~10-13M, ~27 по ГА (гемаглютинирующая активность))