Метод иммуноферметного анализа

вирус грипп инфицирование клетка флуоресцентная детекция

Существуют различные экспериментальные методы исследования взаимодействия антиген-антитело на молекулярном уровне, которые позволяют исследовать структуру и динамику этого взаимодействия.

В настоящее время самым распространенным методом является метод иммуноферментного анализа (ИФА, ELISA). Метод принципиально сходен с РИА, но меткой является молекула фермента, ковалентно связанная с одним из реагентов, а после разделения связанных и свободных реагентов проводится ферментативная реакция, дающая в результате окрашенный продукт, в условиях избытка субстрата. Реакция останавливается (или самотормозится), и количество наработанного продукта измеряется спектрофотометрическим способом. Метод характеризуется высокой чувствительностью.

Наибольшее значение ИФА имеет для определения наличия антител или антигенов в крови или других биологических жидкостях в различных тест-системах. Наиболее распространенными объектами являются белки, их мембранные фракции, вирусные частицы, реже фиксированные клетки. Проведение кинетических исследований затруднено в силу большого количества стадий, необходимых по протоколу, после процесса непосредственного связывания антигена и антитела.

Особенностью методического подхода, реализованного в работе [41], является определение кинетических закономерностей вирус-клеточного взаимодействия вириона с модельными клеточными рецепторами (фетуин) и живыми чувствительными к вирусу гриппа клетками (MDCK).